endoscopia confocal

pCLE, desarrollado por Mauna Kea Technologies , es un sistema que utiliza un haz de fibras para atravesar el  canal de trabajo de 2,8 mm (el orificio hueco) del endoscopio estándar y acceder al tracto gastrointestinal. ^{[ 1 ]} Con un plano de imagen fijo, cada fibra actúa como un orificio para filtrar el ruido no deseado. La velocidad de fotogramas oscila entre 9 y 12 imágenes por segundo. ^{[ 1 ]}

eCLE, desarrollado por Pentax , es un microscopio confocal fijado al extremo del tubo endoscópico. El dispositivo integrado de eCLE tiene un diámetro mayor que el de pCLE, lo que dificulta la intubación endoscópica del tracto gastrointestinal . eCLE dejó de comercializarse debido a la inflexibilidad de la cámara. ^{[ 1 ]}

La CLE es eficaz para detectar lesiones premalignas , incluido el esófago de Barrett , y lesiones malignas ( cancerosas ) en el tracto gastrointestinal superior. ^{[ 3 ] [ 6 ] [ 7 ]} Las modificaciones de la mucosa que se muestran en la histopatología como un índice de malignidad pueden identificarse mediante CLE, como la displasia de alto grado . La CLE también puede implementarse para orientar el tratamiento del esófago de Barrett midiendo la extensión lateral de la neoplasia . ^{[ 3 ] [ 7 ]}

La clasificación de Miami es el sistema más popular en el diagnóstico de CLE esofágico. ^{[ 6 ] [ 8 ]}

De forma similar a la del esófago, la CLE permite detectar el cáncer gástrico en etapa temprana , así como afecciones premalignas, como la gastritis y la metaplasia intestinal . ^{[ 1 ] [ 2 ] [ 6 ]} La CLE puede detectar y distinguir los patrones de las criptas estomacales para identificar la enfermedad de acuerdo con la clasificación de Miami, que se refinó en 2016 para incluir tanto los patrones de las criptas como la arquitectura de los vasos sanguíneos. ^{[ 1 ] [ 2 ] [ 8 ] [ 9 ]} La clasificación refinada permite a los clínicos diferenciar entre lesiones neoplásicas y no neoplásicas. ^{[ 9 ]}

La presencia de Helicobacter pylori también puede identificarse mediante CLE observando los cambios morfológicos en los tejidos. ^{[ 10 ] [ 11 ]}

La CLE revela un patrón de capilares más estrechos con forma de balón de fútbol en los linfomas malignos; arquitectura distorsionada y fuga de fluoresceína desde la luz en el adenocarcinoma de colon; y vellosidades y criptas de forma roma y aumento de linfocitos intraepiteliales en la enfermedad celíaca. ^{[ 1 ] [ 2 ] [ 12 ]}

La CLE se puede utilizar para identificar adenomas y neoplasias en pólipos y lesiones colorrectales . ^{[ 13 ] [ 14 ]} La clasificación de Miami proporciona pautas para que los médicos diferencien las lesiones neoplásicas de las no neoplásicas. ^{[ 8 ]}

Al incorporar un EUS, la CLE puede diagnosticar con precisión las lesiones quísticas pancreáticas , incluidas las lesiones mucinosas y no mucinosas. ^{[ 2 ] [ 16 ]} Se utilizan agujas especiales para recolectar líquido y tejido de la pared del quiste para su análisis. ^{[ 16 ]} El adenocarcinoma ductal pancreático (PDAC) también puede visualizarse mediante CLE. ^{[ 4 ]} Al observar las lesiones quísticas y el PDAC, los médicos pueden identificar la pancreatitis crónica temprana y determinar la malignidad de las lesiones. ^{[ 4 ]}

La estenosis biliar puede visualizarse mediante CLE. ^{[ 1 ]} Las clasificaciones de Miami y París pueden adaptarse para diferenciar las causas cancerosas e inflamatorias . ^{[ 17 ]}

La discriminación entre inflamación y tumores malignos en el pulmón y el sistema urinario puede realizarse mediante CLE, y esto se encuentra actualmente en investigación. ^{[ 10 ] [ 18 ]} Se han propuesto algunos usos, como el diagnóstico de cáncer oral y otros cánceres de cabeza y cuello. ^{[ 19 ] [ 20 ]}

Los anticuerpos contra dianas moleculares se utilizan para diagnosticar enfermedades gastrointestinales mediante histología. ^{[ 21 ] [ 22 ]} La CLE captura la fluorescencia producida por anticuerpos específicos que se unen al factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF). Al comparar la diferencia significativa en la intensidad de la fluorescencia, los médicos pueden diferenciar el tejido normal del neoplásico . La imagen molecular con anticuerpos puede aplicarse a la CLE como referencia diagnóstica debido a su alta correlación con la microscopía ex vivo . ^{[ 21 ]}

La técnica de imagen molecular puede utilizarse de manera similar en el examen del cáncer de cabeza y cuello mediante CLE, aunque los objetivos diagnósticos pueden ser diferentes a los del tracto gastrointestinal. ^{[ 20 ] [ 23 ]}

El láser emitido por CLE a través de un orificio se refleja en el divisor de haz o en un espejo dicroico y se enfoca mediante una lente objetivo . El colorante fluorescente en el tejido objetivo se excita y emite una longitud de onda específica . La emisión del plano focal del tejido se recoge mediante la lente objetivo y el divisor de haz. El láser se filtra finalmente mediante un orificio para reducir el ruido de desenfoque antes de que entre en el detector o tubo fotomultiplicador . ^{[ 1 ]} Al incluir solo la luz reflejada desde el mismo plano focal y excluir cualquier otra dispersión reflejada, el sistema captura una sección pequeña y muy detallada del tejido. Este proceso de iluminación y detección se repite en toda la muestra de tejido para construir una imagen completa. Limitar el plano focal de esta manera permite el seccionamiento óptico, lo que reduce la neblina observada en la microscopía óptica estándar.

Tintes intravenosos

La fluoresceína es el colorante intravenoso más popular para CLE. Es un colorante aprobado por la FDA que se usa de forma rutinaria en clínicas oftalmológicas , ya que aparece verde bajo luz azul cobalto. ^{[ 12 ]} Se aplica comúnmente por vía tópica para identificar enfermedades corneales con microscopios de lámpara de hendidura, como abrasiones corneales , úlceras e infecciones ; o por vía intravenosa para identificar enfermedades retinianas con angiografía , como degeneración macular y retinopatía diabética . En CLE, generalmente se administra por vía intravenosa inmediatamente antes de la intubación de un tubo endoscópico . Se informa que la fluorescencia es más prominente desde unos pocos segundos hasta 8 minutos. ^{[ 1 ]} La fluoresceína se elimina lentamente ; por lo tanto, la fluorescencia disminuye lentamente hasta un nivel mínimo detectable después de 1 hora, lo que proporciona un margen de tiempo para que los médicos investiguen. ^{[ 1 ]}

El campo de visión limitado de la CLE dificulta que los médicos identifiquen la ubicación y la trayectoria de la sonda, lo que complica la correlación entre la imagen obtenida y la ubicación y dirección de la lesión . Se ha propuesto un algoritmo de reconocimiento de criptas que predice el desplazamiento de píxeles según el ángulo y la distancia de movimiento. Al restaurar la trayectoria de exploración de la CLE, los médicos pueden localizar las zonas de interés y mejorar la eficiencia diagnóstica . ^{[ 24 ]}

La resolución de la imagen resultante está determinada por la apertura numérica (AN) de la lente del objetivo, el índice de refracción del medio circundante (η), la longitud de onda de la luz (λ) y el tamaño del orificio. Una longitud de onda más corta permite distinguir características más pequeñas, mientras que una AN más alta permite al sistema captar más luz y resolver detalles más finos. Del mismo modo, los orificios más pequeños pueden bloquear la luz dispersa, aunque si son demasiado pequeños pueden reducir la intensidad de la señal. El índice de refracción del medio que rodea el tejido también influye en la calidad final de la imagen al afectar la forma en que se enfoca la luz del láser. En definitiva, la resolución lateral y axial se puede definir mediante:

R _lateral = 0,4λ / NA ^{[ 25 ]}

R _axial = 1,4λη / (NA) ^{2 [ 25 ]}

Se ha propuesto un nuevo método de evaluación para filtrar las imágenes obtenidas mediante CLE. Dado que la CLE suele presentar distorsiones en las imágenes , la degradación de la calidad y la pérdida de información aumentan la dificultad de un diagnóstico preciso . ^{[ 26 ]} Una nueva evaluación de la calidad de la imagen (IQA), que utiliza la Ley de Weber y descriptores locales, evalúa la calidad y filtra las imágenes con bajo valor diagnóstico. ^{[ 26 ]}

La CLE, al igual que otras técnicas endoscópicas de diagnóstico , puede provocar pancreatitis cuando se utiliza para examinar el páncreas. ^{[ 13 ] [ 27 ]} La probabilidad de pancreatitis es especialmente alta en la CLE con aguja. La incidencia puede minimizarse acortando el tiempo de inspección y evitando el movimiento excesivo de la aguja dentro de la pared del quiste pancreático. ^{[ 13 ]}

Los efectos secundarios leves, que son raros, incluyen ^{[ 1 ].}

• Náuseas
• Vómitos con leve dolor epigástrico.
• Erupción en el lugar de la inyección
• Hipotensión transitoria sin shock
• Eritema difuso

Estos efectos son manejables a menos que los pacientes tengan experiencias previas con ellos. ^{[ 1 ]}

Se han notificado casos de anafilaxia por el uso oftalmológico de fluoresceína. El uso profiláctico de antihistamínicos puede reducir las probabilidades de reacciones alérgicas , o bien las pruebas cutáneas de punción pueden identificar el riesgo de reacciones alérgicas. ^{[ 1 ]}

La acriflavina, otro agente de contraste para CLE, es potencialmente carcinogénica para los humanos debido a su conocida capacidad mutagénica . Por lo tanto, este colorante no está aprobado por la FDA. ^{[ 13 ]}