Proteína G

La proteína G es una proteína de unión a inmunoglobulinas expresada en bacterias estreptocócicas de los grupos C y G, muy similar a la proteína A pero con especificidades de unión diferentes. Es una proteína de superficie celular de aproximadamente 60 kDa (65 kDa para la cepa G148 y 58 kDa para la cepa C40) ^{[ 1 ]} que se ha utilizado en la purificación de anticuerpos mediante su unión a las regiones Fab y Fc . La molécula nativa también se une a la albúmina , pero debido a que la albúmina sérica es un contaminante importante de las fuentes de anticuerpos, el sitio de unión a la albúmina se ha eliminado de las formas recombinantes de la proteína G. Esta proteína G recombinante, marcada con un fluoróforo o una cadena de ADN monocatenario, se utilizó como sustituto de los anticuerpos secundarios en inmunofluorescencia e imágenes de superresolución. ^{[ 2 ]}

Además de la proteína G, otras proteínas bacterianas que se unen a las inmunoglobulinas, como la proteína A , la proteína A/G y la proteína L, se utilizan comúnmente para purificar, inmovilizar o detectar inmunoglobulinas. Cada una de estas proteínas tiene un perfil de unión a anticuerpos diferente en cuanto a la porción del anticuerpo que reconoce y la especie y el tipo de anticuerpos a los que se une.

Una simulación ab initio del dominio B1 de la proteína G demuestra que, como sugerían resultados anteriores, esta proteína inicia el plegamiento mediante un evento de nucleación en los residuos del núcleo hidrofóbico , seguido de pequeños ajustes. ^{[ 3 ]} Los eventos de plegamiento son los siguientes:

1. Se forma una horquilla β , estabilizada por los residuos W43, Y45 y F52.
2. Los contactos entre el residuo F30, en una hélice α , y la horquilla β se fortalecen.
3. Se produce la nucleación de la lámina β a partir de los residuos L5 y F52.
4. El último residuo de nucleación, Y3, ayuda a formar la parte central de la lámina β, lo que da como resultado una proteína globular .

El dominio B1 de la proteína G (también conocido como GB1) se utiliza frecuentemente como parte de una proteína de fusión para mantener otros dominios en solución durante experimentos en solución (por ejemplo, RMN ). Muchos dominios previamente insolubles se han vuelto solubles con la fusión del dominio GB1. ^{[ 4 ]} El dominio tiene 56 residuos (aproximadamente 8 kDa) de longitud. En geles de SDS-PAGE , el dominio GB1 migra a aproximadamente 13,5 kDa a pesar de tener solo 8 kDa. ^{[ 5 ]}

• Módulo GA