matriz de tejido congelado

La matriz de tejidos congelados consiste en tejidos frescos congelados en los que se ensamblan hasta 50 núcleos de tejido separados en forma de matriz para permitir el análisis histológico simultáneo .

La matriz de tejido en parafina se desarrolló a finales de la década de 1980; esta matriz permite a los científicos analizar con alto rendimiento la expresión de genes y proteínas en múltiples muestras de tejido , especialmente los diferentes niveles de proteínas con anticuerpos mediante inmunohistoquímica . Actualmente, existen diversas matrices de tejido en parafina disponibles comercialmente de numerosas empresas de biotecnología. La mayoría de las matrices se pueden fabricar fácilmente con instrumentos de microarrays (Beecher Instruments Inc.). Sin embargo, los tejidos incluidos en parafina presentan limitaciones. Las soluciones de formalina tamponada reticulan las proteínas y los ácidos nucleicos cuando se utilizan para fijar los tejidos. El ADN, el ARN y las proteínas de los tejidos se dañan en diversos grados durante la fijación. Por lo tanto, muchos resultados experimentales científicos obtenidos con tejidos fijados con formalina no son fiables. Dado que las secciones de tejido congelado no se someten a ningún procedimiento de fijación, el ADN, el ARN y las proteínas en los tejidos congelados conservan sus características nativas mucho mejor que en los tejidos incluidos en parafina. Los científicos que desarrollan anticuerpos con fines terapéuticos necesitan los resultados preliminares de los tejidos congelados para obtener la aprobación de la FDA. Por consiguiente, la matriz de tejido congelado debería ser la mejor herramienta para el análisis de alto rendimiento con este fin.

 Se extraen núcleos de tejido congelado de 2 mm de diámetro de las regiones de interés de los bloques de tejido OCT congelados a diferentes temperaturas de congelación, ya que cada tipo de tejido tiene su propia preferencia de temperatura en la etapa de congelación. Luego, todos los núcleos de tejido congelado se insertan en un bloque receptor OCT congelado en un patrón de matriz espaciado con precisión. Se cortan secciones de este bloque usando un criostato, se montan en un portaobjetos de microscopio y luego se analizan mediante cualquier método de análisis histológico estándar. Cada bloque de matriz de tejido congelado se puede cortar en 100 a 500 secciones, que pueden someterse a pruebas independientes. Las pruebas comúnmente empleadas en la matriz de tejido congelado incluyen inmunohistoquímica e hibridación in situ .

• Citómica
• Procedimiento de sección congelada
• Microarrays y expresión génica (MAGE)

• Battifora H: El bloque de tejido multitumoral (en salchicha): un método novedoso para la prueba inmunohistoquímica de anticuerpos. Lab Invest 1986, 55:244-248.
• Battifora H, Mehta P: El bloque de tejido en tablero de ajedrez. Un bloque de control multitejido mejorado. Lab Invest 1990, 63:722-724.
• Kononen J, Bubendorf L, Kallioniemi A, Barlund M, Schraml P, Leighton S, Torhorst J, Mihatsch MJ, Sauter G, Kallioniemi OP: Microarrays de tejido para el perfilado molecular de alto rendimiento de muestras tumorales. Nat Med 1998, 4:844-847.
• Schoenberg Fejzo M, Slamon DJ: Tecnología de microarrays de tejido tumoral congelado para el análisis de ARN, ADN y proteínas tumorales. American Journal of Pathology 2001, 159(5): 1645–50.
• Schoenberg Fejzo M, Slamon DJ. Microarrays de tejido a partir de tejidos congelados: técnica OCT. Methods Mol Biol. 2010, 664:73-80.
• " Matrices de tejido congelado ". BioChain Institute Inc. Consultado el 24 de junio de 2017.