Articulo de referencia

Autofluorescencia

Micrografía de papel que presenta autofluorescencia bajo iluminación ultravioleta . Las fibras individuales de esta muestra tienen un diámetro aproximado de 10 μm . La autofluor...

Micrografía de papel que presenta autofluorescencia bajo iluminación ultravioleta . Las fibras individuales de esta muestra tienen un diámetro aproximado de 10 μm .

La autofluorescencia es la fluorescencia natural de las estructuras biológicas ( autofluoróforos ) [ 1 ] , como las mitocondrias y los lisosomas , en contraste con la fluorescencia originada por marcadores fluorescentes añadidos artificialmente ( fluoróforos ). [ 2 ]

Las moléculas autofluorescentes que se observan con mayor frecuencia son el NADPH y las flavinas ; la matriz extracelular también puede contribuir a la autofluorescencia debido a las propiedades intrínsecas del colágeno y la elastina . [ 2 ]

Generalmente, las proteínas que contienen una mayor cantidad de los aminoácidos triptófano , tirosina y fenilalanina muestran cierto grado de autofluorescencia. [ 3 ]

La autofluorescencia también se produce en materiales no biológicos presentes en muchos papeles y textiles. Se ha demostrado que la autofluorescencia del papel moneda estadounidense es un medio para distinguir la moneda falsificada de la auténtica. [ 4 ]

Microscopía

Imagen multiespectral de tejido del intestino de un ratón , que muestra cómo la autofluorescencia puede enmascarar varias señales de fluorescencia.

La autofluorescencia puede ser problemática en la microscopía de fluorescencia . Se aplican colorantes emisores de luz (como anticuerpos marcados con fluorescencia) a las muestras para permitir la visualización de estructuras específicas.

La autofluorescencia interfiere con la detección de señales fluorescentes específicas, especialmente cuando las señales de interés son muy tenues, ya que provoca que se hagan visibles estructuras distintas a las de interés.

En algunos microscopios (principalmente microscopios confocales ), es posible utilizar diferentes tiempos de vida de los estados excitados de los marcadores fluorescentes añadidos y las moléculas endógenas para excluir la mayor parte de la autofluorescencia.

Imagen de microscopía de superresolución por autofluorescencia/nanoscopía óptica de estructuras celulares invisibles con microscopía óptica confocal.

En algunos casos, la autofluorescencia puede iluminar las estructuras de interés o servir como un indicador diagnóstico útil . [ 2 ]

Por ejemplo, la autofluorescencia celular puede utilizarse como indicador de citotoxicidad sin necesidad de añadir marcadores fluorescentes. [ 5 ]

La autofluorescencia de la piel humana puede utilizarse para medir el nivel de productos finales de glicación avanzada (AGEs), que están presentes en mayores cantidades durante varias enfermedades humanas . [ 6 ]

Autofluorescencia en la cáscara de plátano bajo diferentes condiciones de luz.

Los sistemas de imágenes ópticas que utilizan imágenes multiespectrales pueden reducir la degradación de la señal causada por la autofluorescencia, al tiempo que añaden capacidades de multiplexación mejoradas. [ 7 ]

La microscopía de superresolución SPDM reveló objetos celulares autofluorescentes que no son detectables bajo condiciones de imagen de fluorescencia convencionales. [ 8 ]

Lista de autofluoróforos dominantes

Las sustancias luminiscentes en el tejido animal son, por inclusión taxonómica, también luminiscentes en el tejido humano .

Véase también

Referencias

  1. 1 2 Campbell, Jared M.; Gosnell, Martin; Agha, Adnan; Handley, Shannon; Knab, Aline; Anwer, Ayad G.; Bhargava, Akanksha; Goldys, Ewa M. (2024-06-12). "Evaluación sin marcadores de autofluoróforos biológicos clave: características del material y oportunidades para aplicaciones clínicas" . Advanced Materials . 36 (42). doi : 10.1002/adma.202403761 . ISSN 0935-9648 . Archivado del original el 11 de junio de 2025. 
  2. 1 2 3 Monici, M. (2005). "Investigación y aplicaciones diagnósticas de la autofluorescencia celular y tisular". Biotechnology Annual Review . 11 : 227–256 . doi : 10.1016/S1387-2656(05)11007-2 . ISBN 9780444519528. PMID 16216779 . 
  3. 1 2 3 4 5 Menter, Julian M. (2006). "Dependencia de la temperatura de la fluorescencia del colágeno". Photochemical & Photobiological Sciences . 5 (4): 403– 410. doi : 10.1039/b516429j . PMID 16583021 . S2CID 34205474 .  
  4. Chia, Thomas; Levene, Michael (17 de noviembre de 2009). "Detección de billetes estadounidenses falsificados mediante el tiempo de vida de la fluorescencia intrínseca" . Optics Express . 17 (24): 22054– 22061. Bibcode : 2009OExpr..1722054C . doi : 10.1364/OE.17.022054 . PMID 19997451 . 
  5. Fritzsche, M.; Mandenius, CF (septiembre de 2010). "Enfoques de detección basados ​​en células fluorescentes para pruebas de toxicidad". Anal Bioanal Chem . 398 (1): 181– 191. doi : 10.1007/s00216-010-3651-6 . PMID 20354845. S2CID 22712460 .  
  6. Gerrits, EG; Smit, AJ; Bilo, HJ (marzo de 2009). "AGEs, autofluorescencia y función renal" . Nephrol. Dial. Transplant . 24 (3): 710– 713. doi : 10.1093/ndt/gfn634 . PMID 19033250 . 
  7. Mansfield, James R.; Gossage, Kirk W.; Hoyt, Clifford C.; Levenson, Richard M. (2005). "Eliminación de autofluorescencia, multiplexación y métodos de análisis automatizados para imágenes de fluorescencia in vivo" . Journal of Biomedical Optics . 10 (4): 041207. Bibcode : 2005JBO....10d1207M . doi : 10.1117/1.2032458 . PMID 16178631. S2CID 35269802 .  
  8. Kaufmann, R.; Müller, P.; Hausmann, M.; Cremer, C. (2010). "Visualización de estructuras intracelulares sin marcaje mediante microscopía de localización". Micron . 42 (4): 348– 352. doi : 10.1016/j.micron.2010.03.006 . PMID 20538472 . 
  9. 1 2 Georgakoudi, I.; Jacobson, BC; Müller, MG; Sheets, EE; Badizadegan K.; Carr-Locke, DL; et al. (2002-02-01). "NAD(P)H y colágeno como biomarcadores fluorescentes cuantitativos in vivo de cambios precancerosos epiteliales". Cancer Research . 62 (3): 682– 687. PMID 11830520 .  
  10. 1 2 3 4 5 Zipfel, WR; Williams, RM; Christie, R.; Nikitin, AY; Hyman, BT; Webb, WW (2003-06-10). "Microscopía de emisión intrínseca de tejido vivo mediante fluorescencia nativa excitada por multifotones y generación de segundo armónico" . Actas de la Academia Nacional de Ciencias de los Estados Unidos de América . 100 (12): 7075– 7080. Bibcode : 2003PNAS..100.7075Z . doi : 10.1073/pnas.0832308100 . PMC 165832. PMID 12756303 .  
  11. Schönenbrücher, Holger; Adhikary, Ramkrishna; Mukherjee, Prasun; Casey, Thomas; Rasmussen, Mark; Maistrovich, Frank; et al. (2008). "Método basado en fluorescencia, que aprovecha la lipofuscina, para la detección en tiempo real de tejidos del sistema nervioso central en canales bovinas" . Journal of Agricultural and Food Chemistry . 56 (15): 6220– 6226. doi : 10.1021/jf0734368 . PMID 18620407 .  
  12. Donaldson, Lloyd; Williams, Nari (febrero de 2018). "Imágenes y espectroscopia de fluoróforos naturales en agujas de pino" . Plants . 7 ( 1): 10. doi : 10.3390/plants7010010 . PMC 5874599. PMID 29393922 .  
  13. Gallas, James M. y Eisner, Melvin (mayo de 1987). "Fluorescencia de la melanina: dependencia de la longitud de onda de excitación y la concentración". Fotoquímica y fotobiología . 45 (5): 595– 600. doi : 10.1111/j.1751-1097.1987.tb07385.x . S2CID 95703924 . 
  14. 1 2 Resultados diversos en la literatura que varían según el tipo, la estructura y el método de preparación.
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