Tripsinización

La tripsinización es el proceso de disociación celular que utiliza tripsina , una enzima proteolítica que descompone las proteínas, para disociar las células adheridas del recipiente en el que se cultivan. Cuando se agrega al cultivo celular, la tripsina descompone las proteínas que permiten que las células se adhieran al recipiente. La tripsinización se utiliza a menudo para pasar células a un nuevo recipiente. Cuando se completa el proceso de tripsinización, las células estarán en suspensión y tendrán un aspecto redondeado.

Para fines experimentales, las células suelen cultivarse en recipientes que tienen la forma de frascos o placas de plástico. En dichos frascos, las células reciben un medio de crecimiento que comprende los nutrientes esenciales necesarios para la proliferación y las células se adhieren al recipiente y entre sí a medida que crecen.

Este proceso de cultivo celular o cultivo de tejidos requiere un método para disociar las células del recipiente y entre sí. La tripsina, una enzima que se encuentra comúnmente en el tracto digestivo , se puede utilizar para "digerir" las proteínas que facilitan la adhesión al recipiente y entre las células.

Una vez que las células se han separado de su contenedor, es necesario desactivar la tripsina, a menos que la tripsina sea sintética, ya que las proteínas de la superficie celular también se escindirán con el tiempo y esto afectará el funcionamiento celular. ^[1] El suero se puede utilizar para inactivar la tripsina, ya que contiene inhibidores de proteasa. ^[2] Debido a la presencia de estos inhibidores, el suero debe eliminarse antes del tratamiento de un recipiente de crecimiento con tripsina y no debe agregarse nuevamente al recipiente de crecimiento hasta que las células se hayan separado de su superficie de crecimiento; este desprendimiento se puede confirmar mediante observación visual con un microscopio.

La tripsinización se utiliza a menudo para permitir el paso de células adherentes a un nuevo recipiente, la observación para experimentación o la reducción del grado de confluencia en un matraz de cultivo mediante la eliminación de un porcentaje de las células.