Sephadex es un gel de dextrano reticulado que se utiliza para la filtración en gel . Fue lanzado por Pharmacia en 1959, tras el trabajo de desarrollo de Jerker Porath y Per Flodin . [ 1 ] [ 2 ] Su nombre deriva de " separation Pharmacia dextran " . Normalmente se fabrica en forma de perlas y se utiliza con mayor frecuencia en columnas de filtración en gel . Al variar el grado de reticulación, se pueden modificar las propiedades de fraccionamiento del gel.
Estos medios de cromatografía y filtración en gel altamente especializados están compuestos por microesferas macroscópicas derivadas sintéticamente del polisacárido dextrano. Las cadenas orgánicas se entrecruzan para formar una red tridimensional con grupos iónicos funcionales unidos mediante enlaces éter a las unidades de glucosa de las cadenas de polisacáridos.
Entre las formas disponibles se incluyen intercambiadores de aniones y cationes, así como resinas de filtración en gel, con distintos grados de porosidad; el tamaño de las perlas oscila entre 20 y 300 μm .
Sephadex también se utiliza para cromatografía de intercambio iónico. [ 3 ]
Sephadex está reticulado con epiclorhidrina . [ 4 ]
Aplicaciones
Sephadex se utiliza para separar moléculas según su peso molecular. Es una alternativa más rápida a la diálisis (desalinización), ya que requiere un bajo factor de dilución (tan solo 1,4:1) y ofrece altas recuperaciones de actividad. Sephadex también se utiliza para el intercambio de tampones y la eliminación de moléculas pequeñas durante la preparación de biomoléculas grandes, como anfolitos, detergentes, marcadores radiactivos o fluorescentes y fenol (durante la purificación de ADN).
Una forma especial hidroxipropilada [ 5 ] de resina Sephadex, denominada Sephadex LH-20, se utiliza para la separación y purificación de pequeñas moléculas orgánicas como esteroides, terpenoides y lípidos. Un ejemplo de su uso es la purificación del colesterol. [ 6 ]
Fraccionamiento
Cromatografía de exclusión.
Rango de fraccionamiento [ 7 ] de proteínas globulares y dextranos (Da).
Cromatografía de intercambio iónico.
Los intercambiadores iónicos Sephadex se producen mediante la introducción de grupos funcionales en la matriz de dextrano reticulado. Estos grupos se unen a las unidades de glucosa en la matriz mediante enlaces éter estables. [ 8 ]
Véase también
Referencias
- ↑ "De Sephadex a GE Healthcare" . chemeurope.com . Consultado el 2 de enero de 2019 .
{{cite web}}: CS1 maint: servicio de archivado obsoleto ( enlace ) - ↑ Porath, J; Flodin, P (1959). "Filtración en gel: un método para la desalación y separación de grupos". Nature . 183 (4676): 1657– 1659. Bibcode : 1959Natur.183.1657P . doi : 10.1038/1831657a0 . ISSN 1476-4687 . PMID 13666849 . S2CID 32287460 .
- ↑ "Medios de intercambio iónico Sephadex®" (PDF) . chembio.uoguelph.ca . Pharmacia Biotech. Archivado del original (PDF) el 20 de octubre de 2019. Consultado el 23 de marzo de 2018 .
- ↑ "GE Healthcare Life Sciences - Instrucciones para Sephadex Media" . .gelifesciences.com. Archivado del original el 18 de febrero de 2012. Consultado el 2 de diciembre de 2011 .
- ↑ GE Healthcare. "Sephadex LH-20" . Archivado del original el 1 de agosto de 2020. Consultado el 6 de diciembre de 2019 .
- ↑ Hanukoglu I, Jefcoate CR (1980). "Separación de pregnenolona del colesterol mediante minicolumnas de Sephadex LH-20" . Journal of Chromatography A. 190 ( 1): 256–262 . doi : 10.1016/S0021-9673(00)85545-4 . ISSN 0021-9673 .
- ↑ "Instrucciones para Sephadex Media" (PDF) . gelifesciences.co.jp (manual del producto). GE Healthcare. 7 de abril de 2008. Consultado el 2 de enero de 2019 .
- ↑ "CM Sephadex C-25" . Cytiva . Consultado el 7 de enero de 2025 .
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