Ensayo de secreción

El ensayo de secreción es un proceso utilizado en biología celular para identificar células que secretan una proteína en particular (normalmente una citocina ). Fue desarrollado por primera vez por Manz et al. en 1995.

Por lo general, se aísla una célula que secreta la proteína de interés utilizando un complejo anticuerpo-anticuerpo que recubre la célula y es capaz de "atrapar" las moléculas secretadas. Luego, la célula se detecta mediante otro anticuerpo marcado con fluorocromo y, posteriormente, se extrae mediante un proceso llamado clasificación de células activadas por fluorescencia (FACS). El método FACS es muy similar al formato de anticuerpo del ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas ( ELISA ), excepto que las células encapsuladas permanecen intactas. Esto es ventajoso ya que las células siguen vivas después de que se haya realizado la extracción.

Los avances actuales permiten extraer las células secretoras mediante un sistema de separación magnético o utilizando un citómetro de flujo .

Existen varias aplicaciones comerciales para el análisis de secreciones. Un ejemplo de ello es la tecnología Gel Microdrop (GMD), desarrollada por One Cell Systems. One Cell afirma que la GMD normalmente recupera una mayor cantidad de células secretoras viables que otros métodos, mientras que ignora las células que no secretan la proteína deseada.

• Manz, Rudolf; et al. (marzo de 1995). "Análisis y clasificación de células vivas según las moléculas secretadas, reubicadas en una matriz de afinidad de la superficie celular". Actas de la Academia Nacional de Ciencias . 92 (6): 1921–1925. Bibcode :1995PNAS...92.1921M. doi : 10.1073/pnas.92.6.1921 . PMC  42394 . PMID  7892200.

• Turcanu, Victor; Williams, Neil A. (2001). "Identificación y aislamiento de células en función de la secreción de citocinas: una nueva herramienta para investigar las respuestas inmunitarias". Nature Medicine . 7 (3): 373–376. doi :10.1038/85533. PMID  11231640. S2CID  837840.

• Tecnología de ensayo de secreción por microgotas de gel (GMD) de One Cell Systems.