NeuN

NeuN (Fox-3, Rbfox3 o proteína de unión a hexarribonucleótidos-3) , una proteína homóloga al producto proteico de un gen determinante del sexo en Caenorhabditis elegans , es un antígeno nuclear neuronal que se utiliza comúnmente como biomarcador de neuronas .

NeuN fue descrito por primera vez en 1992 por Mullen et al., quienes generaron una serie de anticuerpos monoclonales contra antígenos de ratón con la intención original de encontrar marcadores inmunológicos específicos de la especie de ratón para su uso en experimentos de trasplante. ^{[ 1 ]} Finalmente, aislaron una línea de hibridoma que produjo un anticuerpo monoclonal llamado mAb A60, el cual demostró unirse a un antígeno expresado únicamente en los núcleos neuronales y, en menor medida, en el citoplasma de las células neuronales, y que parecía funcionar en todos los vertebrados. Por lo tanto, este antígeno se conoció como NeuN, por "Núcleos Neuronales", aunque durante los siguientes 17 años se desconocía a qué se unía el anticuerpo A60. Posteriormente, Kim et al. utilizaron métodos proteómicos para demostrar que NeuN corresponde a una proteína conocida como Fox-3, también conocida como Rbfox3, un homólogo de mamíferos de Fox-1, una proteína identificada originalmente a partir de estudios genéticos de determinación del sexo en el nematodo Caenorhabditis elegans , véase más adelante. ^{[ 2 ]}

El Western blotting muestra que el mAb A60 se une a dos bandas de peso molecular aparente de ~46 kDa y ~48 kDa en SDS-PAGE . Estas dos bandas se generan a partir de un único gen Fox-3 por empalme alternativo . De hecho, hay cuatro productos proteicos del gen Fox-3 como resultado de la presencia o ausencia de dos secuencias de aminoácidos codificadas por dos exones. ^{[ 3 ]} La inclusión o ausencia de 47 aminoácidos del exón 12 da como resultado las bandas de ~46 kDa y ~48 kDa que se ven en los geles de SDS-PAGE, mientras que la inclusión o ausencia de 14 aminoácidos del exón 15 produce dos formas que son demasiado similares en tamaño molecular para ser discernidas en los geles de SDS-PAGE típicos. Curiosamente, la proteína codificada por el exón 15 añade una secuencia de localización nuclear de tipo PY en el extremo C-terminal , lo que presumiblemente explica por qué la proteína NeuN/Fox-3 puede ser tanto nuclear como, en algunos tipos celulares, citoplasmática . Todas las isoformas se expresan únicamente en neuronas, por lo que el anticuerpo monoclonal A60 y otros anticuerpos similares contra NeuN/Fox-3 se han convertido en marcadores neuronales muy utilizados.

Los anticuerpos NeuN se utilizan ampliamente para marcar neuronas, a pesar de algunas limitaciones, y una búsqueda en Pubmed de junio de 2024 utilizando la palabra clave "NeuN" produjo más de 5000 resultados. ^{[ 4 ]} Algunos tipos de células neuronales no son reconocidos por los anticuerpos NeuN, como las células de Purkinje , las células estrelladas y de Golgi del cerebelo, las células mitrales olfativas , los fotorreceptores de la retina y las motoneuronas gamma de la médula espinal . Sin embargo, la gran mayoría de las neuronas son fuertemente positivas para NeuN, y la inmunorreactividad de NeuN se ha utilizado ampliamente para identificar neuronas en cultivos de tejido, en secciones y para medir la proporción neurona/glia en regiones del cerebro. ^{[ 5 ]} La inmunorreactividad de NeuN se hace evidente a medida que las neuronas maduran, típicamente después de que han regulado a la baja la expresión de Doublecortin , un marcador que se observa en las primeras etapas del desarrollo neuronal.

Fox-3 es uno de una familia de tres homólogos de mamíferos de la proteína Fox-1, descubierta originalmente como el producto proteico de un gen involucrado en la determinación del sexo en el nematodo C. elegans . ^{[ 6 ]} "Fox" es un acrónimo de "Locus feminizante en X". El genoma de los mamíferos contiene tres genes homólogos a Fox-1 de C. elegans (también conocido como RBFOX1, A2BP, A2BP1 y HRNBP1), Fox-2 (también conocido como RBFOX2, RBM9, RTA y HRNBP2) y Fox-3 (también conocido como RBFOX3 y HRNBP3). Los nombres HGNC para las tres proteínas son RBFOX1, RBFOX2 y RBFOX3 respectivamente. Las proteínas Fox tienen un tamaño aproximado de 46 kDa y cada una incluye un motivo RRM o de reconocimiento de ARN central y altamente conservado de ~70 aminoácidos . Los dominios RRM son uno de los más comunes en el genoma humano y se encuentran en numerosas proteínas que se unen al ARN . Las tres proteínas Fox de los mamíferos funcionan en la regulación del empalme del ARNm y se unen a secuencias de ARN específicas. ^{[ 7 ]} Un nombre alternativo para las tres proteínas es proteína de unión a hexarribonucleótidos 1, 2 y 3 (HRNBP1, 2 y 3), ya que las tres se unen al hexarribonucleótido UGCAUG, y esta unión está involucrada en su regulación del empalme del ARNm.

A fecha de 15 de junio de 2011, este artículo se deriva total o parcialmente de EnCor Biotechnology Inc. El titular de los derechos de autor ha licenciado el contenido de forma que permite su reutilización bajo las licencias CC BY-SA 3.0 y GFDL . Deben respetarse todos los términos pertinentes. El texto original se encontraba en "Anticuerpo monoclonal contra Fox3/NeuN".