complejo de Artemisa

El complejo Artemis es un complejo proteico que interviene en la recombinación V(D)J , el proceso de recombinación somática que genera diversidad en los receptores de células T y las inmunoglobulinas. Las mutaciones en el complejo Artemis provocan hipersensibilidad a los agentes que inducen roturas de doble cadena del ADN, como la radiación; por lo tanto, las personas con mutaciones en el complejo Artemis pueden desarrollar inmunodeficiencia combinada grave radiosensible (RS-SCID).

La proteína Artemis tiene actividad exonucleasa 5' a 3' específica para cadena simple , pero también puede formar un complejo con la proteína quinasa dependiente de ADN de 469 kDa (DNA-PK _cs ) para adquirir actividad endonucleasa en horquillas y en los extremos 5' y 3' sobresalientes; la DNA-PK _cs fosforila a Artemis para darle esta nueva función. ^{[ 1 ]}

Durante la recombinación V(D)J, el complejo RAG (compuesto por RAG-1 y RAG-2 complejados con HMG1 o HMG2) se une a dos secuencias señal de recombinación (RSS); el complejo se asocia entre sí, acercando las hebras y creando un bucle que contiene todo el ADN entre las dos RSS. Parte de este ADN se elimina y el complejo RAG induce una muesca precisamente en el extremo 5' del heptámero . Esto crea un grupo 3' OH que actúa como nucleófilo en un ataque de transesterificación sobre la hebra antiparalela, generando una horquilla de ADN (dos horquillas, ya que el dímero del complejo RAG se une a dos hebras). En las células linfoides, la recombinación solo puede ocurrir entre una RSS de 12 y una RSS de 23; esto se conoce como la regla 12/23.

Los cuatro extremos del ADN (dos extremos codificantes en horquilla y los dos extremos de señal) se mantienen unidos en un complejo post-escisión por el complejo RAG. El complejo Artemis:DNA-PK _cs , junto con Ku y el dímero ADN ligasa IV/XRCC4, puede cerrar los extremos de señal formando una "unión de señal". También abre las horquillas de los extremos codificantes, y se cree que este proceso está mediado por el complejo RAG (el complejo RAG puede abrir horquillas libres por sí mismo, pero esto solo se observa en tampones que contienen manganeso, y no en tampones que contienen magnesio). La desoxinucleotidil transferasa terminal (TdT) añade nucleótidos a los extremos abiertos. Esto ocurre hasta que se forman secuencias complementarias, momento en el que las hebras opuestas se aparean. Las exonucleasas eliminan los nucleótidos no apareados y las ligasas rellenan los huecos. Esto crea una unión entre cada segmento unido, que contiene un número indeterminado de adiciones de nucleótidos, flanqueada por una secuencia palindrómica de 2 residuos.

El sistema Artemis:DNA-PK _cs también se utiliza para procesar los extremos 5' y 3' en la unión de extremos de ADN no homólogos.